eIF1 và eIF1A đều liên kết với phức hợp tiểu phần ribosome 40S-mRNA. Chúng cùng nhau tạo ra một cấu trúc "mở" của kênh gắn mRNA, là yếu tố quan trọng để quét, vận chuyển tRNA và bắt đầu nhận dạng codon.[3] Đặc biệt, phân ly eIF1 từ tiểu đơn vị 40S được coi là một bước quan trọng trong việc nhận diện codon mở đầu.[4]

eIF1 và eIF1A là các protein nhỏ (chỉ nặng 13 và 16 kDa, tương ứng ở người) và cả hai đều là thành phần của PIC 43S. eIF1 liên kết gần vị trí P của ribosome, trong khi eIF1A liên kết gần vị trí A. Hai yếu tố này có cấu trúc và chức năng theo thứ tự tương tự với yếu tố mở đầu IF3 và IF1, ở sinh vật nhân sơ.[5]